Contents:

Kultivierung von Blut- und Knochenmarkzellen.- 1. Einleitung.- 2. Knochenmark.- 2.1. Gewinnung des Materials.- 2.2. Praparation der Chromosomen aus Zellen in der Mitose oder Pramitose ohne Kultur.- 2.3. Versand von Knochenmarkpunktaten.- 2.4. Bemerkungen zur Herstellung von Chromosomenpraparaten.- 2.5. Langzeitkulturen von Knochenmarkzellen.- 3. Kultur der Zellen des peripheren Blutes.- 3.1. Vollblutkulturen.- 3.2. Kultur von Leukocyten nach Abtrennung der Erythrocyten.- 3.2.1. Abtrennung der Erythrocyten.- 3.2.2. Trennung der mononuclearen und polymorphkernigen Leukocyten.- 3.2.3. Wahl des Kulturmediums.- 3.2.4. Zusatze zum Kulturmedium.- 3.2.5. Aufbewahrung der Kulturmedien.- 3.2.6. Kulturdauer.- 3.2.7. Anreicherung der Mitosen.- 3.3. Aufbewahrung und Verschickung von Blutproben.- 3.4. Verfahren bei Leukamien.- 3.5. Langzeitkulturen aus Zellen des peripheren Blutes.- 3.6. Lymphocyten aus Lymphknoten, Thymus und Milz.- 4. Phytohamagglutinin: Eigenschaften und Wirkungsweise.- Anhang: Laboratoriumsvorschriften.- Literatur.- II Zellkulturen aus Gewebsexplantaten.- 1. Allgemeine Bemerkungen.- 1.1. Anwendungsbereiche.- 1.2. Material.- 1.3. Methoden.- 2. Besprechung der Methoden.- 2.1. Techniken der Gewebsentnahme.- 2.2. Ansatz von Gewebsexplantaten und Zellkultur.- 2.2.1. Enzymatische Dissoziation von Gewebsexplantaten.- 2.2.2. Ansatz solider Explantate.- 2.2.2.1. Plasma-Methode.- 2.2.2.2. Ansatz zwischen Deckglasern ("Sandwich"-Methode).- 2.2.2.3. Explantate unter perforiertem Cellophan.- 2.2.3. Kultur im CO2-Brutschrank.- 2.2.4. Sonderfall: Abortusmaterial.- 2.3. Abbrechen der Kulturen zur Chromosomenpraparation.- Anhang I: UEbersicht uber einzelne Methoden.- Anhang II: Katalog der Reagenzien, Medien und Kulturgefasse.- Literatur.- III Praparation von Mitose-Chromosomen.- 1. Einleitung.- 2. Praparation von Zellsuspensionen.- 2.1. Ausgangsmaterial.- 2.2. Allgemeines zum Praparationsgang.- 2.3. Praparation durch Lufttrocknen.- 2.4. Praparation durch Quetschen.- 3. Direktpraparation von Monolayer-Kulturen.- 4. Farbung.- Anhang: Laboratoriumsanleitungen.- Literatur.- IV Autoradiographie an menschlichen Chromosomen mit 3H-Thymidin.- 1. Einleitung.- 2. Theoretische Grundlagen.- 2.1. Der chemische Aufbau von DNS.- 2.2. Der DNS-Synthese-Cyclus.- 2.3. Der Einbau von Thymidin in die DNS.- 2.4. Tritium-Thymidin.- 2.5. Das autoradiographische Filmmaterial.- 2.5.1. Emulsionen.- 2.5.2. Stripping-Filme.- 3. Techniken.- 3.1. Markierung mit Tritium-Thymidin.- 3.1.1. Kontinuierliche Markierung.- 3.1.2. Puls-Markierung.- 3.2. Aufarbeitung der Kulturen und Herstellen von Chromosomenpraparaten.- 3.3. Die autoradiographische Technik.- 3.3.1. Bedecken der Praparate mit autoradiographischem Filmmaterial.- 3.3.2. Exposition.- 3.3.3. Entwickeln und Fixieren des autoradiographischen Films.- 3.3.4. Farbung.- 3.3.5. Auswerten der Chromosomen-Autoradiographien.- 3.3.6. Herstellen von Kontrollbildern durch Entfernen der Silberkoerner und Abloesen des autoradiographischen Films.- 4. Einige Ergebnisse der Markierungsversuche an Chromosomen.- 4.1. Die DNS-Synthese innerhalb einzelner Chromosomen.- 4.2. Verteilung der neusynthetisierten DNS auf die Tochterzellen.- Anhang: UEbersicht uber das Verfahren.- Literatur.- V Der Karyotyp des Menschen.- 1. Einleitung.- 2. Chromosomen der normalen Metaphase.- 2.1. Untersuchungsmaterial.- 2.2. Lokalisation einzelner Chromosomen.- 2.3. Alterseffekt und Chromosomenzahl.- 2.4. Einflusse der Zellkultur auf Chromosomenzahl und -struktur.- 3. Der Standardkaryotyp.- 4. Variationen des Karyotyps.- 5. Identifizierung einzelner Chromosomen durch spezielle Methoden.- 5.1. Autoradiographie.- 5.2. Chromosomenmessung.- 6. Erhebung und Auswertung von Befunden.- 6.1. Die Analyse.- 6.2. Diagnose von Chromosomenmosaiken.- 6.3. Analyse von Chromosomenbruchen.- 6.4. Chromosomenanalyse durch Computer.- 6.5. Archivierung cytogenetischer Daten.- 7. Chicago-Nomenklatur (1966).- Anhang: Tabellen.- 1. Altersabhangiges XO/XX-Mosaik.- 2. Haufigkeit von Chromosomenvarianten.- 3. Definition von Replikationsstadien am Ende der S-Phase.- 4. Diagnose eines Chromosomenmosaiks.- 5. Analyse von Bruchen.- 6. Symbole der Chicago-Nomenklatur.- Literatur.- VI Chromosomen in der Meiose.- 1. Einleitung.- 2. UEbersicht uber den Ablauf der Meiose beim Menschen.- 3. Praparation meiotischer Prophasefiguren.- 3.1. Mannliches Geschlecht.- 3.2. Weibliches Geschlecht.- 4. Praparation meiotischer Metaphasefiguren.- 4.1. Mannliches Geschlecht.- 4.2. Weibliches Geschlecht.- 5. Interpretation von Meiosebeobachtungen.- 5.1. Gibt es polyploide Keimzellen ?.- 5.2. Chiasmafrequenz.- 5.3. Vorzeitige Trennung der Homologen.- 5.4. Trivalente.- 5.5. Quadrivalente.- 6. Zusammenfassung.- Literatur.- VII Untersuchung des Sexchromatins.- 1. Einleitung.- 2. Gewinnung des Materials.- 2.1. Allgemeine Bemerkungen.- 2.2. Schleimhautabstriche.- 2.3. Zellisolation-(Zupf-)Praparate.- 2.4. Hautchenpraparate.- 2.5. Gewebekulturen.- 2.6. Schnittpraparate.- 3. Fixierung.- 3.1. Wahl des Fixierungsmittels.- 3.2. Ausstriche, Hautchenpraparate und Monolayerkultur.- 3.3. Isolierte Zellen aus festem Gewebe.- 3.4. Groessere Gewebebloecke.- 4. Farbung.- 5. Auswertung der Praparate.- 5.1. Allgemeine Bemerkungen.- 5.2. Schleimhautabstriche.- 5.3. Gewebekulturen.- 5.4. Hautchenpraparate vom Amnion.- 5.5. Pranatale Geschlechtsbestimmung.- 5.6. Schnittpraparate.- 5.7. Polyploide Zellen.- 5.8. Malignes Gewebe.- Anhang: Laboratoriumsvorschriften.- Literatur.- VIII Sexchromatin-Diagnostik mit Hilfe des Leukocytentests.- 1. Einleitung.- 2. Methodik.- 3. Auswertung.- Literatur.